原核蛋白表达技术服务
E.coli蛋白表达技术服务
E.coli蛋白表达服务项目简介
我们自主开发的促溶标签、密码子算法和培养基系统可显著提升蛋白的可溶性表达并有效避免包涵体的产生，获得具有生物学活性的目标蛋白，表达量可达1g/L。
我们的技术优势
自主研发的NusA突变体融合表达标签，有效提高可溶性表达量；
优化的自诱导培养基，避免了IPTG对菌株的毒性；
自主设计的多个蛋白共表达系统，有效实现蛋白复合体的表达；
自主研发的密码子计算系统，提高蛋白表达量。
表达预估时间
|
流程 |
内容 |
时间 |
|
基因合成 |
将目的基因经过密码子优化并合成后插入到表达载体 |
2~6周 |
|
小试表达 |
转入三个菌株进行3ml小试表达验证 |
~4天 |
|
大量表达 |
跟进实际需求放大到200ml表达体系 |
~5天 |
|
蛋白纯化 |
跟进表达产物的特点进行相应的纯化和验证 |
2~5天 |
案例分享
原核表达可溶性上清（Ni-IDA，AKTA纯化仪）
M: protein marker
Load: 10000g离心后的上清
FT：流穿液
E1-E3: 200mM 咪唑洗脱
2. 多个蛋白共表达（≥2个蛋白）
多个蛋白共表达（Ni-IDA，AKTA纯化仪）
M: protein marker
Load: 10000g离心后的上清
FT：流穿液
Wash：洗杂
E1: 200mM 咪唑洗脱
3. 表达菌株筛选
4. 促溶标签优化 NusA vs SUMO
5. NusA突变体优化提高可溶性表达量
左图：采用NusA wt 右图：采用自主研发的NusA mutant
创建时间：2023-08-16
넶浏览量：0
